Pri manipulácii s mikroorganizmami je dôležité správne používať aseptickú techniku-aby ste zabránili kontaminácii svojich mikroorganizmov vonkajšími silami, ako aj aby ste chránili seba a ľudí vo svojom okolí.
Kroky
Krok 1. Chráňte sa
Zviažte si dlhé vlasy a oblečte si laboratórny plášť a ochranné okuliare.
Krok 2. Umyte si ruky a pracovný priestor
Umyte si ruky vodou a mydlom a postriekajte lavicu 70% etanolom.
Krok 3. Rozložte všetko svoje vybavenie
Pred štartom sa uistite, že máte všetko pripravené.
Krok 4. Zapnite bunsen horák čo najvyššie
Budete to potrebovať na sterilizáciu svojho zariadenia a vzostupný prúd zabraňuje prieniku vonkajších kontaminantov do vašej kultúry.
Otočte golier tak, aby bol prúd vzduchu úplne otvorený
Krok 5. Sterilizujte očkovaciu slučku
Držte ho zhruba v uhle 45 ° nadol a pomaly ho pohybujte plameňom, aby žiarilo červeno-bielo.
- Je najľahšie držať slučku medzi palcom a ukazovákom a podporovať ju prostredníkom.
- Najhorúcejšia časť plameňa je priamo na špičke vnútorného modrého ohnivého kužeľa.
Krok 6. Druhou rukou uchopte svoju pôvodnú kultúru
- Ak je to tanier, podržte ho a otvorte veko tak, aby sa slučka dostala dovnútra.
- Ak ide o tubu s vekom, odstráňte viečko malíčkovým prstom ruky, ktorou držíte očkovaciu slučku, potom dvakrát rýchlo pretiahnite otvor trubice cez plameň bunsenovho horáka. Toto sa nazýva horenie a zabíja všetko, čo sa chce dostať do trubice, a vytvára konvekčný prúd, ktorý vytláča vzduch z trubice, takže sa k nej nič nemôže dostať. V nasledujúcom kroku sa pinky držte viečka.
Krok 7. Inokulujte
Dotknite sa očkovacej slučky kolónie, ktorú chcete vyzdvihnúť. Ak očkujete z tekutého vývaru, očkovaciu slučku ponorte do skúmavky a slučkou zatraste, aby ste získali dostatok baktérií.
Krok 8. Zatvorte pôvodnú kultúru
Ak je to tanier, jednoducho zatvorte veko a dajte ho späť. Ak je to trubica, dvakrát pretiahnite otvor cez plameň bunsenovho horáka a potom nasaďte veko späť.
Krok 9. Otvorte nový tanier
Rovnako ako predtým, voľnou rukou otvorte veko dostatočne široko, aby sa doň dostala slučka
Krok 10. Doska s baktériami
Očkovaciu slučku zľahka potiahnite po povrchu a dávajte pozor, aby ste neprenikli do agaru.
Bežným vzorom pruhov je kvadrantová metóda
Krok 11. Zatvorte tanier
Krok 12. Sterilizujte očkovaciu slučku
Rovnako ako predtým ho držte pod uhlom 45 ° nadol a pomaly ho pohybujte plameňom, aby rástol červeno-bielo.
Tipy
- Rukavice nie sú vo všeobecnosti potrebné. Všetky vyššie uvedené kroky slúžia na ochranu vás aj vašich baktérií, takže riziko kontaminácie je veľmi nízke. Rukavice môžu spôsobiť škaredé popáleniny, ak sa ich omylom dotknete horúcou očkovacou slučkou.
- Majte na pamäti, že pracujete s ohňom. Nie je to nič hrozné, len sa uistite, že viete, čo máte robiť, ak sa popálite; pozastavte experiment, popáleninu opláchnite vodou a v prípade potreby to oznámte svojmu nadriadenému.
- Ak robíte viac cyklov, pretože musíte používať aseptickú techniku, nie je potrebné bunsenový horák medzi jednotlivými cyklami úplne vypínať - stačí ho vypnúť na pilotný plameň a úplne ho vypnúť až vtedy, keď ste úplne hotoví.
